Protocole de séparation des pigments chlorophylliens par chromatographie

 

Matériel disponible et protocole pour séparer les pigments chlorophylliens de feuilles d'épinard :

Matériel :

 

Pour la chromatographie (permet de séparer les différents pigments)

- éprouvette (250 mL) avec bouchon et dispositif d’accroche du papier Whatman, remplie de- solvant pour chromatographie 

- feutre

- pipette pasteur

- papier Whatman n° 1

- sèche-cheveux

- boîtes en bois

 

Protocole :

- Sur une bande de papier à chromatographie, tracer un trait au crayon à papier à 2cm du bas de la feuille Ajouter les initiales de votre groupe en haut de la bande de papier du côté de l'encoche qui permettra de suspendre la bande.

- Déposer à l'aide d'une pipette pasteur sur le trait  une goutte de la solution de chlorophylle brute, sécher au sèche cheveux.

- Superposer de la même façon jusqu'à 10 gouttes.

- Suspendre le papier à chromatographie dans l'éprouvette contenant le solvant. Attention à la position du papier : le dépôt devra se situer au dessus du niveau du solvant.

- Déplacer délicatement l'éprouvette dans la boîte en bois fermée et laisser l'éprouvette dans l'obscurité pendant 15 à 30 minutes

- Le solvant va imbiber le papier et migrer vers le haut, en emportant avec lui les pigments. Les pigments iront plus ou moins loin en fonction de  leur vitesse de migration qui dépend de leur solubilité différentielle dans le solvant et de leur affinité pour le support de chromatographie. Ainsi les pigments seront séparés.

 

Sécurité

Précautions de la manipulation