Protocole de l'expérience

Melvin Calvin et ses collaborateurs (James Bassham  et Benson) mettent au point un dispositif dans lequel des algues (chlorelles) sont maintenues en suspension en présence de dioxyde de carbone marqué (¹⁴CO₂) pendant un temps plus ou moins long. Les substances synthétisées par les algues incorporant le ¹⁴C sont radioactives et peuvent être identifiées par chromatographie bidimentionnelle et autoradiographies. Les chlorelles sont laissées en présence de ¹⁴CO₂ ,d'abord 2 secondes, puis 5 secondes et enfin 5 minutes. Les chlorelles sont brutalement tuées au bout de chacun de ces temps et des chromatographies/ autoradiographies sont aussitôt réalisées. Le 0 indique la position initiale de l'extrait avant chromatographie.

• alanine, glycine, sérine et acide aspartique sont des acides aminés ; ces molécules protidiques ont incorporé de l'azote (N) apporté par la sève brute,
• le ribulose biphosphate (Ru. 1-5 biphosphate ou C5P2) est une moléculeà 5 atomes C, acceptrice de CO₂ ; il est renouvelé,
• acide phospho- glycérique ((= APG) et l'acide pyruvique sont des molécules à 3 C,
• les hexoses phosphates sont des sucres à 6 atomes C,
• l'acide malique est une molécule à 4 atomes C.

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