Expérience de Taylor (1958) :

mise en évidence de la réplication semi-conservative de l'ADN

 

L'autoradiographie

La méthodologie de taylor repose sur des expériences de marquage à l'aide d'éléments radioactifs et obtention de clichés (= autoradiographie). Après culture des racines dans un milieu contenant une substance radioactive susceptible de s'incorporer dans le végétal, on rince, on fixe (pour tuer les cellules et bloquer toutes les réactions biochimiques), on coupe les racines et on les recouvre d'une émulsion photographique qui sera développée ultérieurement. L'impression du papier photographique se fait au niveau des zones radioactives: on observe des taches noires marquant l'emplacement des molécules radioactives.

L'expérience de Taylor (1958)

Des racines de liliacées sont placées  dans un milieu de croissance contenant de la thymine radioactive (marquée par du tritium 3H, isotope radioactif de l'hydrogène). La thymine (T) est une base azotée de l'ADN.

T0 : les plantules sont laissées dans le milieu radioactif le temps d'un cycle cellulaire. Quelques cellules sont prélevées, après blocage à la métaphase et soumises à l'autoradiographie: dessin T0 , réalisé à partir d'une photographie (seules 4 paires de chromosomes sont représentées dans l'interprétation).

T1 : les plantules sont soigneusement lavées puis transférées sur un milieu de culture non radioactif où elles continuent leur croissance. Après l'interphase qui suit, des cellules sont prélevées et traitées pour bloquer la division cellulaire à la métaphase puis soumises à l'autoradiographie: dessin T1 , réalisé à partir d'une photographie (seules 4 paires de chromosomes sont représentées dans l'interprétation).
T2 : les plantules restent sur le milieu normal (non radioactif) pendant un cycle cellulaire supplémentaire: des cellules sont alors prélevées et soumises à l'autoradiographie: dessin T2 , réalisé à partir d'une photographie (seules 4 paires de chromosomes sont représentées dans l'interprétation).

IMPORTANT !

Pour  qu'une chromatide soit radioactive, il suffit que la molécule d'ADN qui la constitue ait un brin sur deux marqué par le tritium

Passer la souris sur l'autoradiographie de l'expérience de Taylor  pour obtenir son interprétation. Cliquer pour télécharger une photographie de l'expérience de Taylor

(fermer la fenêtre)